马钱子碱和士的宁在人肝微粒体和UGT1A4重组酶中的体外酶动力学研究

摘要

目的 考察士的宁和马钱子碱在体外人肝微粒体(HLMs)和UDP-葡萄糖醛酸转移酶(UGTs)1A4中的代谢动力学,及UGT1A4抑制剂对士的宁和马钱子碱在HLMs中葡糖醛酸化反应的抑制作用.方法 采用HPLC-MS/MS测定士的宁和马钱子碱在体外孵育体系中代谢产物含量,GraphPad Prism软件计算酶促反应最大反应速率(Vmax)、米氏常数(Km)等酶动力学参数;通过抑制试验观察UGT1A4特异性抑制剂海柯皂苷元对士的宁和马钱子碱在HLMs中Ⅱ相代谢影响.结果 在HLMs和UGT1A4孵育体系中,马钱子碱和士的宁均生成1个单葡萄糖醛酸代谢产物,二者在HLMs中的代谢产物酶促反应参数Km分别为(76.23±7.77)、(66.55±11.46)μmol/L,Vmax分别为(4.21±0.24)、(6.60±0.59)nmol/(min·mg);在人重组UGT1A4孵育体系中Km分别为(56.52±11.63)、(63.33±13.32)μmol/L,Vmax分别为(8.30±0.83)、(2.53±0.27)nmol/(min·mg).HLMs孵育体系中加入UGT1A4特异性抑制剂海柯皂苷元后,马钱子碱和士的宁代谢产物含量均显著降低.结论 UGT1A4是马钱子碱和士的宁Ⅱ相代谢葡糖醛酸化主要亚酶,临床可能存在二者基于UGT1A4酶的药物相互作用.