C1GALT1C1蛋白在IgA肾病发病中的作用初探及靶向C1GALT1C1 miRNA的筛选

摘要

目的:初步探讨伴侣蛋白C1GALT1C1在IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)发病中的作用及从患者外周血单核细胞中筛选靶向C1GALT1C1基因的miRNA.方法:收集入住我院的IgAN和健康成人外周抗凝血,分离获取单核淋巴细胞,各分成两份.一份用于提取单核淋巴细胞细胞总蛋白行免疫印迹实验检测C1GALT1C1蛋白水平.慢病毒载体介导DAKIKI细胞发生C1GALT1C1基因沉默并检测细胞分泌的糖基化低下的IgA1水平.另一份IgAN和健康成人外周血单核淋巴细胞用于miRNA表达谱测序、生物信息学分析与靶向C1GALT1C1基因的miRNA筛选.结果:IgAN患者外周单核淋巴细胞C1GALT1C1蛋白平均水平下调约40％;慢病毒载体介导DAKIKI细胞发生C1GALT1C1基因沉默后细胞分泌的糖基化水平低下IgA1水平升高;miRNA表达谱发现有123个差异表达在2倍以上的miRNA,其中有25个表达上调,它们的预测靶基因都为C1GALT1C1.结论:伴侣蛋白C1GALT1C1的低表达可能对IgAN发病起了一定的作用;从IgAN患者外周血单核细胞中筛选到靶向C1GALT1C1基因的25个miRNA对于该病的诊断和预后可能有一定的指导意义.