昆虫杆状病毒表达系统中人骨形成蛋白3的表达及鉴定

摘要

目的　探索人骨形成蛋白 3(h BMP3)在昆虫杆状病毒系统中的表达规律 .方法　将 h BMP3全长 c DNA克隆入转移载体 Bac PK8中 ,酶切鉴定后 ,将此载体与病毒 DNA经脂质体包裹转染昆虫细胞 ,重组病毒经蓝白筛选后 ,提取其DNA进行 PCR反应 ,鉴定目的基因 .收集重组病毒感染 5 d的细胞进行免疫荧光及电子显微镜观察 .结果　克隆了目的基因的重组载体经内切酶消化后 ,琼脂糖电泳示有相应大小的目的基因片段切下 .PCR电泳结果见有目的基因片段的扩增 .免疫荧光检测见阳性颗粒分布在昆虫细胞的胞质及胞膜 ,电镜下见重组病毒无多角体颗粒 ,与野生型杆状病毒完全不同 .结论　初步证实 h