突变型与野生型TNF-α诱导肿瘤细胞的凋亡

摘要

目的: 比较重组人突变型471rhTNF-α(mt 471rhTNF-α)与野生型rhTNF-α(wt rhTNF-α)诱导肿瘤细胞发生凋亡的能力,并对mt 471rhTNF-α诱导肿瘤细胞发生凋亡的作用机制进行初步研究. 方法: 以乳腺癌细胞系ZR75-1细胞为靶细胞,应用基因组DNA琼脂糖凝胶电泳及流式细胞技术分析mt 471rhTNF-α与wt rhTNF-α诱导肿瘤细胞凋亡的情况;利用以ELISA为基础的Trans AMTM NF-κB p65试剂盒检测经mt 471rhTNF-α或wt rhTNF-α处理的ZR75-1细胞核因子NF-κB的活化情况,以便对其诱导凋亡的机制进行初步的研究. 结果: 20 g/L琼脂糖凝胶电泳显示,mt 471rhTNF-α处理组的ZR75-1细胞基因组DNA呈现明显的ladder状分布,wt rhTNF-α处理组的"ladder"条带明显减弱;流式细胞仪分析显示,mt 471rhTNF-α诱导的细胞凋亡峰面积高于wt rhTNF-α处理组. NF-κB活化检测结果显示,当两型rhTNF-α浓度增高到50 μg/L时,wt rhTNF-α处理组的NF-κB的活化量明显高于同浓度的mt 471rhTNF-α处理组(P=0.002). 结论: mt 471rhTNF-α诱导肿瘤细胞凋亡的能力明显优于wt rhTNF-α;肿瘤细胞内NF-κB活化明显受抑是mt 471rhTNF-α诱导凋亡能力增强的主要原因之一.