人骨形成蛋白4成熟肽cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达

摘要

目的:克隆编码人骨形成蛋白4(hBMP4)成熟肽的 cDNA基因,并在大肠杆菌中表达.方法:从人胎盘组织中提 取总RNA,以其为模板,采用RT PCR方法得到编码hBMP4 的成熟肽段(hBMP4m)cDNA,克隆入表达载体pDH2中,转 化大肠杆菌DH5α,温度诱导表达.结果:获得hBMP4mcDNA基因,成功克隆入温度诱导表达载体pDH2,DNA序列分析证 实所插入的hBMP4mcDNA序列与设计预期一致;将获得重 组表达质粒pDH2 hBMP4m转化大肠杆菌DH5α中,经温度诱 导,目的蛋白占细菌总蛋白的41.5%.结论:采用分子克隆的 方法得到编码hBMP4成熟肽段的cDNA,克隆入表达载体,在 大肠杆菌中成功获得hBMP4成熟肽的高效表达.