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REPLI-g®Single Cell Kit应用于微量DNA扩增的效率评估

     

摘要

目的 评估REPLI-g?Single Cell Kit应用于检材DNA扩增的效率,探讨该试剂盒在法医学微量DNA扩增方面的应用价值.方法 选取3种微量DNA提取试剂盒,对来自10名无关个体的外周血进行DNA提取,并对所提DNA的产量和纯度进行比较.根据比较结果选取1例DNA样本进行浓缩稀释作为全基因组扩增起始样本,使用REPLI-g?Single Cell Kit对起始样本进行全基因组扩增,计算扩增产量及扩增倍数,并进行琼脂糖凝胶电泳检测片段分布情况.使用Goldeneye?DNA身份鉴定系统20A对起始样本和经全基因组扩增所得DNA进行STR分型.结果 经比较后选取由QIAsymphony?DNA Investigator?Kit所提取的1例DNA进行浓缩稀释作为全基因组扩增起始样本.经REPLI-g?Single Cell Kit对一系列起始样本全基因组扩增后,发现扩增产量均值最低可达到8.77×103 ng,相应的扩增倍数均值为1.40×106,DNA片段大且集中.全基因组扩增样本随着起始样本量的减少,STR分型成功率降低,但当起始样本量低于0.5 ng时,全基因组扩增后样本的STR分型成功率高于相同起始量未经全基因组扩增样本的STR分型成功率.结论 应用REPLI-g?Single Cell Kit可有效提高模板DNA总量,特别对于微量DNA,可在一定程度上提高STR分型成功率.

著录项

  • 来源
    《法医学杂志》|2019年第2期|210-215|共6页
  • 作者单位

    温州医科大学基础医学院法医学系,浙江 温州 325035;

    司法鉴定科学研究院 上海市法医学重点实验室 上海市司法鉴定专业技术服务平台,上海 200063;

    上海交通大学医学院附属第九人民医院超声诊断科,上海 201999;

    司法鉴定科学研究院 上海市法医学重点实验室 上海市司法鉴定专业技术服务平台,上海 200063;

    内蒙古医科大学法医学教研室,内蒙古 呼和浩特 010030;

    司法鉴定科学研究院 上海市法医学重点实验室 上海市司法鉴定专业技术服务平台,上海 200063;

    内蒙古科技大学包头医学院,内蒙古 包头 014060;

    司法鉴定科学研究院 上海市法医学重点实验室 上海市司法鉴定专业技术服务平台,上海 200063;

    司法鉴定科学研究院 上海市法医学重点实验室 上海市司法鉴定专业技术服务平台,上海 200063;

    温州医科大学基础医学院法医学系,浙江 温州 325035;

    司法鉴定科学研究院 上海市法医学重点实验室 上海市司法鉴定专业技术服务平台,上海 200063;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 法医物证检验学;
  • 关键词

    法医遗传学; 短串联重复; 全基因组扩增; 多重置换扩增; 微量检材;

  • 入库时间 2023-07-25 15:30:36

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