林蛙油的DNA提取及鉴定方法

摘要

目的 建立基于分子生物学鉴定林蛙油真伪的检测方法.方法 采集成年雌蛙卵巢组织,经风干制成林蛙油,通过改良方法提取总DNA,以已报道的东北林蛙、黑龙江林蛙、黑斑侧褶蛙、牛蛙和中华蟾蜍的COI及cytB基因为模板,设计引物探针.结果 PCR扩增产物测序结果中仅东北林蛙获得230 bp左右产物,且序列比对与东北林蛙COI序列一致性为99％左右,说明实验对象林蛙为东北林蛙.结论 利用线粒体基因独特的优势,应用PCR扩增东北林蛙COI基因,通过测序确定东北林蛙亚种,建立了东北林蛙亚种及其产品的鉴别方法.