大菱鲆1个CXCL10样趋化因子的克隆、鉴定与表达分析

摘要

趋化因子是一类趋化性细胞因子的总称,它们在白细胞的趋化反应中起着重要作用.本研究从构建的大菱鲆(Scophthalmus maximus)脾脏cDNA文库中筛选到一种大菱鲆CXC趋化因子,经过5'-RACE和3'-RACE扩增得到了它的全长cDNA.该趋化因子的全长cDNA含有1个79 bp的5'UTR,1个372 bp的开放阅读框(ORF)和1个227 bp的3'UTR.开放阅读框编码123个氨基酸残基.此CXC趋化因子基因内含有4个外显子和3个内含子,3个外显子的碱基长度分别为591 bp、86 bp和372 bp.Blast分析和系统发生分析都表明这个趋化因子和已知的脊椎动物的CXCIL10相近.用鳗弧菌(Vibrio anguillarum)感染大菱鲆后12h,该趋化因子在肝脏和脾脏中表达水平达到最高,在头肾中则是在感染后5 h表达水平最高.在肝脏中,从感染后12 h开始该趋化因子的表达水平逐渐下降并且在72 h后恢复到正常水平.在脾脏中,一直到感染后24 h该趋化因子保持高水平表达,随后表达水平减弱至正常水平.在头肾中,从感染后5 h开始一直到24 h,表达水平逐渐升高,随后表达水平,立刻降低至与正常水平一致.在正常的大菱鲆组织内没有检测到该趋化因子的表达,表明它仅在受到鳗弧菌感染的时候才被诱导表达.结论认为该趋化因子在免疫反应中可能起着重要作用.