Percoll不连续密度梯度离心法分离红螯光壳螯虾血细胞

摘要

建立了利用Percoll不连续密度梯度离心分离红螯光壳螯虾血细胞的方法,并对配制分离体系的缓冲液以及分离体系的密度组成进行了优化.结果 显示,由20％、65％和100％的Percoll组成的分离体系分离效果最优.在转速为1 810 r/min的条件下离心20 min之后,可将红螯光壳螯虾血细胞分为SGC与GC 2个细胞层.经流式细胞术分析,发现细胞层纯度均在95％以上,细胞死亡比率低于1.5％,可用于后续的细胞功能分析.此方法简单有效,为后续研究螯虾的免疫防御机制及病害防治方法奠定了基础.