杂色鲍14-3-3ζ基因的克隆及其在应激下的表达

摘要

酪氨酸3-加单氧酶/色氨酸5-加单氧酶激活蛋白ζ(14-3-3ζ蛋白)是14-3-3蛋白家族的亚型之一.14-3-3蛋白是一种高度保守的酸性可溶性蛋白,它可以与激酶、磷酸酶等多种信号蛋白结合,并在信号转导和细胞凋亡等过程中发挥相应的作用.本实验通过SMART-RACE技术首次获得了杂色鲍14-3-3ζ基因的全长,并命名为Hd14-3-3ζ,其cDNA全长为3 010 bp,ORF为819 bp,共编码272个氨基酸.实时荧光定量PCR结果显示,Hd14-3-3ζ基因在杂色鲍各组织中均有表达,其中在肝胰腺和血细胞中的表达量相对较高.当处于缺氧环境下时,鳃组织中Hd14-3-3ζ的表达在4h时存在显著差异,血细胞中Hd14-3-3ζ在24 h和96 h时表达量显著上调.高温应激下,Hd14-3-3ζ在血细胞中的表达量无显著变化,而鳃组织中Hd14-3-3ζ在96 h的表达量却显著上调.高温缺氧联合应激实验表明,鳃组织中Hd14-3-3ζ在4h、24 h和96 h均显著上调,而血细胞中的表达量没有显著性变化.经检测发现,副溶血弧菌注射后,鳃组织中Hd14-3-3ζ在3h和24 h,血细胞中在6h和24 h的表达量显著上调.以上温度、溶氧量等环境因素以及病原菌的刺激均会导致Hd14-3-3ζ在不同组织中表达量的显著变化,说明Hd140-3ζ在杂色鲍的免疫反应中可能扮演着重要的角色.