5株猫杯状病毒中国分离株的细胞适应性及遗传进化分析

摘要

将CH-JL1、CH-JL2、CH-JL3、CH-JL4、CH-SH 5株猫杯状病毒中国分离株分别在F81细胞上连续传至15代.细胞传代前,测定病毒的细胞半数感染量(TCID50),再以0.1 MOI的感染复数接种细胞.采用RT-PCR方法扩增FCV各代次的ORF2基因片段并测序,用DNASTAR和MEGA软件分析其氨基酸变异和遗传进化特点.试验结果显示,细胞适应传代后,FCV各代次毒株滴度逐渐稳定,均位于10-9 TCID50/mL～10-10TCID50/mL之间.ORF2基因测序表明,FCV传代后氨基酸变异位点包括CH-JL1的P57S和G494R、CH-JL3的S440L和N519D、CH-JL4的V614I、CH-SH的K448R.遗传进化分析表明CH-JL2和CH-JL3处于同一进化分支上,同源性为95.9％;CH-JLI和国内FB-NJ-13株、CH-SH和国内GD株分别在一个进化分支,CH-JL4和国外F65株遗传关系较近.5株猫杯状病毒在F81细胞传代后滴度较高,稳定性良好,为将来FCV疫苗株的研发奠定了基础.