土贝母苷甲通过调控circ_0000376/miR-203轴影响皮肤鳞状细胞癌SCL-1细胞恶性表型

摘要

目的:探讨土贝母苷甲对皮肤鳞状细胞癌SCL-1细胞恶性表型的影响及可能机制.方法:将体外SCL-1细胞分为对照组、不同剂量(5、10、20μg/mL)土贝母苷甲组、si-NC组、si-circ_0000376组、土贝母苷甲+pcDNA组和土贝母苷甲+pcDNA-circ_0000376组,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,Tran-swell检测细胞迁移和侵袭,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中Ki-67、MMP-2、MMP-9、Bcl-2和Bax蛋白表达,RT-qPCR检测circ_0000376和miR-203表达.双荧光素酶报告基因实验验证circ_0000376和miR-203调控关系.对照组与不同剂量土贝母苷甲组各检测指标比较用单因素方差分析;si-NC组与si-circ_0000376及土贝母苷甲+pcDNA组与土贝母苷甲+pcDNA-circ_0000376组各检测指标比较行独立样本t检验.结果:与对照组比较,土贝母苷甲组SCL-1细胞增殖抑制率、凋亡率及Bax蛋白表达升高(F值分别为772.61、352.20、277.56,P值均<0.01),细胞迁移数、侵袭数及Ki-67、MMP-2、MMP-9和Bcl-2蛋白表达降低(F值分别为125.57、180.50、257.87、301.22、399.27、233.29,P值均<0.01),circ_0000376表达降低(F=205.36,P<0.01),miR-203表达升高(F=247.14,P<0.01),且呈剂量依赖性.与si-NC组比较,si-circ_0000376组SCL-1细胞增殖抑制率、凋亡率及Bax蛋白表达升高(t值分别为36.78、21.56、25.20,P值均<0.01),细胞迁移数、侵袭数及Ki-67、MMP-2、MMP-9和Bcl-2蛋白表达降低(t值分别为16.00、17.79、21.73、21.02、21.62、19.68,P值均<0.01).双荧光素酶报告基因实验结果显示,circ_0000376靶向负调控miR-203.与土贝母苷甲+pcDNA组比较,土贝母苷甲+pcDNA-circ_0000376组SCL-1细胞增殖抑制率、凋亡率及Bax蛋白表达降低(t值分别为35.31、19.65、19.55,P值均<0.01),细胞迁移数、侵袭数及Ki-67、MMP-2、MMP-9和Bcl-2蛋白表达升高(t值分别为12.27、21.37、24.15、23.40、23.48、22.28,P值均<0.01).结论:土贝母苷甲可能通过调控circ_0000376/miR-203轴抑制皮肤鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭,并促进细胞凋亡.