人表皮干细胞的体外培养与MSCs对其诱导的初步研究

摘要

目的:探讨人表皮干细胞体外分离培养的理想方法,初步研究骨髓间充质干细胞(MSCs)上清对其生长的影响.方法:采用中性蛋白酶-胰蛋白酶两步法收获表皮细胞,Ⅳ型胶原快速粘附分选表皮干细胞,用无血清培养基进行体外培养,采用SABC-FITC进行培养细胞鉴定.结果:胎儿皮肤和人包皮皮肤均可成功分离到表皮干细胞集落,且增殖能力强,细胞表达β1整合素和角蛋白CK19.MSCs上清形成的条件培养基的诱导下,收集的表皮细胞形成花环样克隆,并形成成纤维样细胞.结论:用酶消化法、胶原快速粘附和无血清培养法是较理想的体外分离培养表皮干细胞的方法,MSCs可以诱导表皮细胞的定向分化.