TLR-3激动剂联合TLR-9激动剂对树突状细胞细胞形态及免疫表型的影响

摘要

目的 了解TLR激动剂对负载CD34^+白血病细胞的DC的细胞形态及免疫表型的影响,为研究DC的功能、进一步探索体外白血病细胞免疫原性的增强提供依据。方法 收集急性髓细胞白血病初发患者(不包括M3,根据FAB分型)新鲜骨髓抗凝血3-5 mL,经密度梯度离心法分离获得外周血单个核细胞,采用免疫磁珠法分选出CD34^+细胞;体外培养获得DC,然后将DC与药物凋亡的CD34^+白血病细胞融合培养,使用Toll样受体(TLR)激动剂的不同组合(TLR-3激动剂联合TLR-9激动剂)来进一步成熟DC以获得功能性DC,观察其细胞形态和免疫表型特征。结果 ①在倒置显微镜下,成熟DC细胞体积变大,半悬浮,形状不规则,多个毛刺状突起于表面,具有成熟DC的典型形态特征;②流式检测细胞表面CD11c表达明显增加,CD14表达下调,表明DC的转化生成;③TLR3激动剂(poly I∶C)联合TLR9激动剂(CpG DNA)诱导负载CD34^+白血病细胞的DC的成熟,其表面CD11c、CD86阳性表达较单药组及空白对照组明显升高,联合刺激组能进一步使DC成熟。结论 TLR3激动剂及TLR9激动剂作为刺激DC成熟佐剂,具有临床应用前景。