人源骨肉瘤原代细胞的分离及其CDX模型和PDX模型的构建

摘要

目的 建立骨肉瘤患者人源肿瘤细胞系异种移植(CDX)模型和人源移植(PDX)模型,获得与患者肿瘤细胞相似的原代肿瘤细胞.方法 获取1例右胫骨骨肉瘤患者的新鲜肿瘤活性组织,无菌条件下转移至实验室.将其中一部分剪切为2 mm3组织块,种植于培养皿中.获取细胞后,使用胰蛋白酶消化法和反复贴壁法分离原代肿瘤细胞.将原代肿瘤细胞植入BALB/c裸鼠背部皮下和胫骨髓腔,待肿瘤长至直径1～2 cm时,收获组织,制备HE切片.将另一部分组织植入BALB/c裸鼠背部皮下,待肿瘤体积长至800 ～1 500 mm3,取出一代肿瘤组织,将其中部分冻存,其余组织再次植入BALB/c裸鼠背部皮下传代.结果 所获得CDX模型和PDX模型肿瘤细胞与患者病理切片细胞形态相似.结论 采用患者骨肉瘤组织原代细胞分离与BALB/c裸鼠肿瘤移植等方法,可建立患者来源的骨肉瘤CDX和PDX模型并获得与患者肿瘤细胞相似的原代肿瘤细胞.