青藤碱对阿霉素肾病大鼠PI3K/mTOR信号通路及系膜增生的影响

摘要

目的 探讨青藤碱对阿霉素肾病大鼠肾组织中磷脂酰-3激酶(phosphatidyl-3 kinase,PI3K)/雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路及系膜增生的影响,探究其保护作用机制.方法 选用SD大鼠50只,随机取10只经尾静脉注射生理盐水作为正常(Con-trol)组,其余 40 只大鼠经尾静脉注射阿霉素5 mg/kg,共注射7 d,制备肾病综合征(nephrotic syn-drome,NS)模型,造模成功后,随机分为模型组(NS组)、青藤碱低剂量组(25 mg/kg)、青藤碱中剂量组(50 mg/kg)、青藤碱高剂量组(100 mg/kg),每组10只.Control组、NS组经腹腔给予生理盐水,青藤碱各剂量组经腹腔给予相应剂量药物1次/d,共给药28 d.末次给药24 h后,收集各组大鼠血液、尿液后处死大鼠,并取肾组织标本,检测各组大鼠血肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(u-rea nitrogen,BUN)、24 h尿蛋白定量;采用HE染色观察各组大鼠肾脏病理形态变化并计算系膜基质指数;采用透射电镜观察各组大鼠肾小球基底膜增厚情况;采用蛋白免疫印迹法检测各组大鼠肾组织 p-PI3K/PI3K、p-mTOR/mTOR、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)和Ⅳ型胶原蛋白(type Ⅳ colla-gen,COL4)蛋白表达情况.结果 与Control组相比,NS组大鼠肾小球系膜基质增加、肾小管管腔扩张等病理损伤现象及肾小球基底膜增厚严重,且NS组大鼠系膜基质指数、Scr、BUN、24 h尿蛋白定量和肾组织p-PI3K、p-mTOR、FN、COL4蛋白表达量明显升高(P＜0.05).与NS组相比,青藤碱高、中、低剂量组大鼠肾小球基底膜增厚等病理损伤缓解,系膜基质指数、Scr、BUN、24 h尿蛋白定量和肾组织p-PI3K、p-mTOR、FN、COL4蛋白表达明显降低(P＜0.05).与青藤碱低剂量组比较,青藤碱中、高剂量组肾小球基底膜增厚及肾脏病理损伤最轻,系膜基质指数、Scr、BUN、24 h尿蛋白定量和肾组织p-PI3K、p-mTOR、FN、COL4蛋白表达明显降低(P＜0.05).结论 青藤碱可能通过抑制PI3K/mTOR信号通路激活,减轻肾小球系膜细胞增生,延缓NS进程.