间充质干细胞中血红素加氧酶⁃1的过表达抑制NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3炎症小体活化改善大鼠急性肺损伤

摘要

目的 探究过表达血红素加氧酶?1(HO?1)的骨髓间充质干细胞(BMSCs)对大鼠急性肺损伤(ALI)的作用及其可能机制.方法 将40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、BMSCs?NC组和BMSCs?HO?1组,每组各10只.应用腹腔注射脂多糖(LPS)建立ALI大鼠模型.BMSCs?NC组大鼠尾静脉注射阴性对照BMSCs,BMSCs?HO?1组大鼠尾静脉注射过表达HO?1的BMSCs,其余组大鼠尾静脉注射生理盐水.检测各组大鼠肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞数;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测BALF中肿瘤坏死因子(TNF)?α、白细胞介素(IL)?6和IL?1β水平.采用苏木素?伊红(HE)染色检测肺组织病理学变化;测定大鼠肺组织湿/干重比(W/D);实时荧光定量聚合酶链反应(qRT?PCR)检测HO?1、表面活性蛋白C(SP?C)mRNA表达水平;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测HO?1、SP?C、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和cleaved?Caspase?1蛋白表达水平.结果 与对照组相比,模型组大鼠BALF中细胞总数、中性粒细胞数、巨噬细胞数、TNF?α、IL?6、IL?1β水平、肺损伤评分及W/D均明显升高,肺组织中HO?1和SP?C mRNA、蛋白表达水平均明显降低,NLPR3、ASC和cleaved?Caspase?1蛋白表达水平均明显升高(P<0.05).与模型组相比,BMSCs?NC组大鼠BALF中细胞总数、中性粒细胞数、巨噬细胞数、TNF?α、IL?6、IL?1β水平、肺损伤评分及W/D均明显升高,肺组织中HO?1和SP?C mRNA、蛋白表达水平均明显升高,NLPR3、ASC和cleaved?Caspase?1蛋白表达水平均明显降低(P<0.05).与BMSCs?NC组相比,BMSCs?HO?1组大鼠各项指标均得到进一步改善(P<0.05).结论 过表达HO?1的BMSCs可能通过抑制NLPR3炎症小体活化改善大鼠ALI.