钙调蛋白结构域来源小分子多肽的构建

摘要

目的 构建钙调蛋白结构域来源小分子多肽(EF-hand 4,a.a 113-148),建立一种简便、直观、快速检测EF-hand 4的电泳方法.方法 通过固相合成法构建EF-hand 4.采用分离胶为16.5％T的Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳法检测多肽,CS Analyzer 3.0软件对EF-hand 4多肽条带进行纯度分析,GST pull-down方法检测EF-hand 4的生物学活性.结果 Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳结果显示,在约4×103处可见EF-hand 4清晰蛋白条带;CS Analyzer 3.0软件分析其纯度为100％;GST pull-down结果表明,EF-hand 4可以和CaV1.2钙通道结合,具有生物学活性.结论 Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳法可简便、直观、快速检测EF-hand 4,固相合成法得到的EF-hand 4具有与钙通道结合的生物学活性,本研究为CaM结构域来源EF-hand 4生物学功能的深入研究提供了材料基础.