复式滋养层培养法构建组织工程化小鼠角膜上皮的实验研究

摘要

目的 探讨构建组织工程化小鼠角膜上皮的理想方法.方法 在Transwell气液界面培养系统中,利用复式滋养层培养法构建组织工程化小鼠角膜上皮,HE染色进行组织学观察,分别利用RT-PCR、Western blot以及免疫荧光法检测上皮祖细胞标记p63、角蛋白19(K19)以及分化标记被膜素(involucrin)的表达.结果 复式滋养层培养法构建可成功小鼠角膜上皮,上皮层数达5～7层.与RT-PCR和Western blot结果一致,免疫荧光结果显示上皮基底细胞层和基底细胞上层表达p63和K19,角膜上皮全层均表达involucrin.结论 复式滋养层培养法可保持培养细胞的干细胞性质,是构建组织工程化小鼠角膜上皮的理想方法.