人源性鼻咽癌抗独特型单链抗体基因G22真核表达载体的构建及表达鉴定

摘要

目的:构建含人源性鼻咽癌抗独特型单链抗体基因G22的真核表达载体,并观察其在直肠癌细胞(rectal cancer cells,CMT-93)中的表达.方法:将目的基因G22克隆入真核质粒pcDNA3.1(+)中构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-G22,并进行酶切鉴定和DNA序列测定.用脂质体法将重组质粒转染入CMT-93细胞,以Western免疫印迹、流式细胞术和免疫荧光检测G22基因的表达.结果:酶切鉴定和DNA序列分析证实,重组质粒pcDNA3.1(+)-G22含有人源性鼻咽癌抗独特型单链抗体基因G22的全长序列,转染实验表明G22基因能在真核细胞CMT-93中正确表达.结论:人源性鼻咽癌抗独特型抗体基因G22真核表达载体构建及其在CMT-93细胞中的表达均获成功,为基因疫苗的进一步研究奠定了基础.