黄芪桂枝五物汤调节M1/M2巨噬细胞改善炎症反应的分子机制研究

摘要

目的探讨黄芪桂枝五物汤调节M1/M2巨噬细胞极化的机制。方法U937细胞经脂多糖诱导为M1巨噬细胞,建立α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAchR)沉默和激动模型,实验分为对照组、10%含药血清组、siRNA阴性对照(NC)10%含药血清组、siRNAα7nAchR10%含药血清组和α7nAchR激动剂GTS-21组。免疫荧光检测M1、M2型巨噬细胞数量,定量反转录PCR检测M1、M2型巨噬细胞标志基因mRNA表达水平,酶联免疫吸附测定检测M1型巨噬细胞产生的促炎因子和M2型巨噬细胞产生的抗炎因子水平,蛋白质印迹法检测巨噬细胞α7nAchR表达。结果与对照组相比,10%含药血清组M1型巨噬细胞数量减少(P<0.01),M2型巨噬细胞数量增加(P<0.01);M1型巨噬细胞基因黏附蛋白白细胞整合素(Cd11c)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达均降低(P<0.01),M2型巨噬细胞基因精氨酸酶1(Arg1)、甘露糖受体1(CD206)表达均升高(P<0.01);M1型巨噬细胞产生的促炎因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6含量减少(P<0.01),M2型巨噬细胞产生的抗炎因子IL-10和转化生长因子-β(TGF-β)含量升高(P<0.01);10%含药血清组、siRNA NC 10%含药血清组、GTS-21组α7nAchR表达均增加(P<0.01)。与siRNAα7nAchR 10%含药血清组比较,siRNA NC 10%含药血清组、GTS-21组M1型巨噬细胞数量减少(P<0.01),M2型巨噬细胞数量增加(P<0.01);siRNA NC 10%含药血清组Cd11c、iNOS表达降低(P<0.01),Arg1表达升高(P<0.01);siRNA NC 10%含药血清组IL-1β、IL-6含量减少(P<0.01),IL-10、TGF-β含量升高(P<0.01);siRNA NC 10%含药血清组、GTS-21组α7nAchR表达均增加(P<0.05,P<0.01)。结论黄芪桂枝五物汤可能通过激动α7nAchR促使M1/M2型巨噬细胞极化,改善炎症反应。