禽偏肺病毒C型核衣壳N蛋白的哺乳动物细胞表达系统表达及鉴定

摘要

利用哺乳动物细胞表达系统对禽偏肺病毒C型核衣壳N蛋白进行表达,并检测所表达融合蛋白的抗原性.首先将N基因克隆到真核表达载体pEGFP-C1中,构建重组真核表达载体,然后将阳性重组质粒转染BHK-21细胞,通过倒置荧光显微镜和共聚焦显微镜检测N蛋白的表达,并用Western blot检测表达蛋白的抗原性.结果显示,禽偏肺病毒核衣壳N蛋白主要表达在细胞浆中,在转染后48 h后表达量最高;与抗N蛋白抗体有抗原性,所表达核衣壳N融合蛋白大小为72 kDa左右,与预期结果一致.结论,本试验成功应用哺乳动物表达系统表达了禽偏肺病毒C型核衣壳N蛋白,表达蛋白具有抗原性,为与禽偏肺病毒核衣壳N蛋白的相关研究奠定了基础.