文昌鱼头部cDNA文库的构建

摘要

采用cDNA合成技术制备文昌鱼头部cDNA基因文库 .以mRNA为模板 ,用NotIprimer Adaptor为引物 ,在反转录酶的作用下 ,合成第一链cDNA ,进而合成第二链cDNA .含有EcoRI和NotI粘性末端的双链cDNA在T4DNA连接酶作用下与λgt1 1EcoRI/NotI臂相连 ,包装蛋白包装 ,得到噬菌体颗粒 ,即原始的文昌鱼头部cD NA文库 .经X Gal/IPTG板测定 ,该文库滴度为 7.8× 1 0 5 pfu/cm3 ,重组率为 70 % .