功能性猪α干扰素基因的表达及活性检测

摘要

[目的]检测克隆猪α干扰素基因(IFN-α基因)在毕赤酵母中的表达.[方法]经植物血凝素(PHA)诱导后,提取猪外周血淋巴细胞, 并用RT-PCR方法获得IFN-α基因,将该基因与真核表达质粒pPIC9K连接,并电转入毕赤酵母GS115菌中,经甲醇诱导表达后,SDS-PAGE电泳检测IFN-α蛋白表达, Western-blot分析IFN-α蛋白活性.[结果]重组转化菌株经甲醇诱导后能表达相对分子质量约为19 kD的蛋白质,该蛋白质能与相应抗体产生免疫反应.[结论]实现了猪功能性IFN-α基因表在毕赤酵母中表达,为进一步探讨IFN-α的生物学活性研究奠定了基础.