表达dsRNA的转基因烟草能阻止烟草花叶病毒的侵染

摘要

将烟草花叶病毒(Tobacco mosaicvirus,TMV)的部分运动蛋白基因(△MP)构建成反向重复结构,插入植物表达载体pBin438上,通过三亲交配法导入根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)菌株EH105后通过农杆菌介导法转化烟草(Nicotiana tabacam)品种云烟87,获得了50株转基因烟草.PCR和Southem blot分析表明目标基因已整合到烟草植株的基因组内.用TMV对转基因烟草进行挑战接种,症状观察和病毒浓度的TAS-ELISA检测表明,转基因烟草对TMV的抗性包括3种类型:免疫型占10%;抗病型占4%;感病型占86%.Northern blot分析表明,目标基因mRNA在不同抗病类型植株中的积累量存在明显差异,目标基因mRNA的积累量与抗病性成负相关.