玉米颗粒结合型淀粉合成酶(GBSS)基因cDNA的克隆及植物表达载体的构建

摘要

根据已发表的玉米颗粒结合型淀粉合成酶(granule-bound starch synthase,GBSS)基因序列,设计2对引物,其中1对为定点突变的过度引物.从授粉后15 d的玉米(Zea mays)胚乳中提取总RNA,以反转录合成的cDNA第1链为模板,用定点突变、RT-PCR和融合PCR的方法克隆了GBSS基因的全长cDNA(1 818 bp)片段.序列测定表明,该片段与文献报道的序列具有99.72%的同源性.并构建了以胚乳特异性表达特性的gt1为启动子,以nos-ter为终止子的植物表达载体pBI-gt1-GBSS,其含有npt Ⅱ选择标记基因.