表达伪狂犬病毒gC糖蛋白基因重组腺病毒的构建及其免疫效果

摘要

通过双酶切将伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)Fa株gC囊膜糖蛋白基因片段亚克隆到5型腺病毒AdMax系统穿梭质粒pDC316中,得到pDC316-gC.用此质粒与腺病毒DNA辅助质粒pBHGloxΔE1,3Cre共转染293细胞,包装出重组腺病毒Adv-gC.通过PCR鉴定和病毒空斑纯化,得到纯的高效价Adv-gC病毒液.间接免疫荧光实验证明此重组病毒能表达PRV gC蛋白.该病毒经肌注免疫Balb/c小鼠,能诱导小鼠产生特异的体液和细胞免疫反应.攻毒试验表明,此重组病毒能提供100%的免疫保护.