转Bt cry1Ah基因抗虫玉米的获得及其遗传稳定性分析

摘要

Bt cry1Ah基因是从国内苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)分离株BT8中克隆鉴定的新型杀虫蛋白基因.研究利用该基因构建了植物表达载体pHUAh,用基因枪法转化玉米杂交组合Q31×Z31的胚性愈伤组织,得到13株阳性转基因玉米(Zea mays L.)植株.通过生物活性分析筛选得到了2个高抗转基因事件B1-1和B1-7,对其T1～T5代转基因植株进行了5代跟踪检测,结果表明,外源基因在玉米植株可以稳定表达,并且可以逐代稳定遗传.利用ELISA对不同转化事件以及同一转化事件不同组织部位的Cry1Ah蛋白的表达量进行分析,发现陔基因在不同转化事件之间以及同一转化事件不同组织部位表达量都存在差异.对T2～T5代转基因植株田间虫测结果显示,转基因玉米对亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis)具有显著的抗性,且逐代稳定遗传.B1-1和B1-7有望成为Bt抗虫玉米育种工作的备选材料.