基于PI3K/Akt信号通路探讨宣痹通瘀方对急性心肌缺血大鼠心肌细胞凋亡的保护作用

摘要

目的研究宣痹通瘀方对急性心肌缺血大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法冠脉结扎法制备急性心肌缺血大鼠模型(假手术组只置手术线而不结扎)。造模成功的大鼠随机分为阳性对照组、心肌缺血模型组、宣痹通瘀方低、中、高剂量组以及宣痹通瘀方高剂量加LY294002(PI3K抑制剂,以下简称为LY)组。造模次日开始给药,宣痹通瘀方高、中、低剂量组灌胃给药体积相同、浓度不同。宣痹通瘀方高剂量加LY组除按照高剂量组给药方法灌胃给药以外,每日需皮下注射LY 10 mg/(kg·d)。假手术组与模型组均给予等体积的0.5%羧甲基纤维素钠混悬液。对照组给予同体积麝香保心丸混悬液。每日灌胃给药1次,连续2周。心肌组织取材,TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数;免疫组化法检测凋亡相关蛋白的表达;透射电镜下观察心肌细胞形态;Western Blot检测磷酸化的PI3K、Akt蛋白表达。结果宣痹通瘀方能够抑制心肌细胞凋亡(P<0.01);降低Caspase-9、Caspase-3、Bax蛋白表达(P<0.01或P<0.05),上调Bcl-2表达(均为P<0.01);保护心肌细胞超微结构;p-PI3K、p-Akt蛋白的表达显著增高(P<0.01)。结论宣痹通瘀方可能通过调控PI3K/Akt信号通路抑制心肌细胞凋亡,从而对急性心肌缺血大鼠心肌发挥保护作用。