比较两种方法提取人脐带间充质干细胞外泌体的效果

摘要

目的比较两种方法提取人脐带间充质干细胞来源外泌体的效果。方法分别采用超速离心法和组合优化法提取人脐带间充质干细胞上清液中外泌体,获得的外泌体设为外泌体A和外泌体B,采用透射电镜观察外泌体形态,纳米颗粒跟踪分析法检测外泌体浓度和粒径,BCA法测定外泌体蛋白含量以及Western blot法检测外泌体表面标志物的蛋白表达。结果两种方法提取的外泌体均具有茶托形或椭圆形的双膜性结构,且边界清晰,但是外泌体B背景中存在其他聚合物。外泌体A浓度与外泌体B相仿(P>0.05)。外泌体A、B粒径峰值分别为128、101 nm。外泌体A蛋白含量高于外泌体B,且外泌体A表面特异性标志物CD9、CD63、CD81和TSG101蛋白表达高于外泌体B(P<0.05)。结论两种方法均可以提取人脐带间充质干细胞来源的外泌体,但超速离心法提取的外泌体纯度更高。