猪流行性腹泻病毒变异株RT-PCR检测方法的建立

摘要

猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)可引起猪呕吐、腹泻和脱水,各年龄段的猪均可发病,而哺乳仔猪发病和死亡最为严重.2010年末发生的仔猪腹泻综合征的主要病原为PEDV变异株.根据PEDV变异株S基因发生碱基缺失和插入的特征设计并合成了1对特异性引物,首次建立了PEDV变异株的RT-PCR检测方法.结果表明,所建立的PCR检测方法特异性强,不和PEDV经典毒株反应,也不与其他动物病原反应;敏感性较高,最低可检测10-3 ng/μL,且重复性较好.用该方法对2013-2014年我国华东地区猪场的318份临床样品进行检测,结果发现109份样品(34.3％)为PEDV变异株阳性,表明我国腹泻猪群中PEDV变异株感染较为普遍.本研究建立的PCR方法可以作为PEDV变异株在临床上的一种鉴别诊断技术.