Brachyury上调基质金属蛋白酶(MMPs)与促进肺癌细胞转移的机制

摘要

目的 探讨Brachyury上调基质金属蛋白酶(MMPs)与促进肺癌细胞转移的机制.方法 购置H1299细胞、H460细胞,完成细胞的转染及稳转细胞的培养;选择对数生长期的H1299细胞、H460细胞,利用Lipofectamine2000转染、干扰,构建si-RNA对Brachyury表达,形成shRNA-NC、shRNA-Brachyury细胞,设定对照细胞.采用实时荧光PCR技术测定不同细胞中MMPs mRNA表达水平;采用Transwell法检测3种细胞0h、24h、48 h及72 h细胞侵袭能力;采用Western blot测定3种稳转细胞Brachyury水平.结果 shRNA-Brachyury细胞中MMPs12、24、7、9水平均高于shRNA-NC细胞、H460细胞,差异均有统计学意义(均P＜ 0.05);shRNA-NC细胞中MMPs12、24、7、9水平均低于H460细胞,差异均有统计学意义(均P＜ 0.05);Transwell检测结果表明,H460细胞、shRNA-NC细胞侵袭率比较,差异无统计学意义(P＞0.05);shRNA-Brachyury细胞侵袭能力低于H460细胞、shRNA-NC细胞,差异有统计学意义(P＜0.05);Western blot测定结果表明,shRNA-Brachyury细胞中Brachyury蛋白水平高于shRNA-NC、H460细胞,差异均有统计学意义(均P＜0.05);shRNA-NC细胞中Brachyury蛋白水平低于H460细胞,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Brachyury能通过上调MMPs水平促进肺癌细胞转移,从而能促进疾病的发生、发展,有望成为肺癌新的治疗靶点.