不同微环境对人骨髓间充质干细胞体外增殖和分化的影响

摘要

目的 评价不同微环境对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)体外增殖和分化的影响.方法 采用全骨髓贴壁分离法培养hBMSC,传至第3代后分别在4种微环境下培养:10％FBS组、10％CS组、1g/L植物源重组人血清白蛋白(OsrHSA)组、单纯DMEM组.采用CCK-8比色法测定细胞一周增殖率.以不加成骨诱导液为对照组,实验组添加成骨诱导液后第1周和第2周行碱性磷酸酶染色,第3周和第4周行茜素红染色,评估不同时段各组细胞成骨分化程度.结果 采用单纯DMEM组培养hBMSC,细胞增殖率基本不变,后期下降;10％FBS组、10％CS组和1 g/L OsrHSA组均能显著提高hBMSC增殖率(P＜0.05),以10％FBS组效果最好.碱性磷酸酶染色和茜素红染色显示,单纯DMEM组和对照组均未发现钙沉积阳性细胞;10％ FBS组、10％CS组和1 g/L OsrHSA组在各阶段均出现阳性染色,随着诱导时间延长颜色明显加深;10％CS组和1 g/L OsrHSA组各时间段阳性染色程度明显较10％FBS组弱,10％CS组其次,1 g/L OsrHSA组最差.结论 细胞外基质微环境对hBMSC生长分化至关重要,含血清的微环境能更好地促进hBMSC增殖及维持hBMSC分化特性.