食管鳞状细胞癌中MGP基因的表达和启动子区甲基化状态及其临床意义

摘要

目的研究基质Gla蛋白(MGP)在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达和启动子区甲基化状态,探讨MGP对ESCC细胞侵袭的影响.方法收集2014年5月至2019年5月于中国人民解放军空军第九八六医院就诊的253例ESCC患者的ESCC组织标本和癌旁非癌组织标本,分别设为ESCC组和癌旁非癌组.采用实时荧光定量PCR(Real-timeqPCR)法检测MGPmRNA的相对表达量,采用蛋白质印迹法检测MGP的蛋白表达水平,采用免疫组织化学染色法评估MGP蛋白在组织中的定位和分布,采用甲基化酶消化法、DNA亚硫酸氢盐修饰法及Real-timeqPCR法分析MGP基因启动子区的甲基化状态.构建重组MGP过表达质粒和DNA甲基化转移酶1的沉默质粒(si-DNMT1).将人ESCC细胞系KYSE30分为对照组、si-DNMT1组、阴性对照(si-NC)组、MGP过表达组和空载体(EV)组,采用Transwell小室法检测各组细胞的侵袭能力.结果与癌旁非癌组织相比,ESCC组织中MGPmRNA和蛋白表达水平均显著升高,差异均有统计学意义(P均<0.05).免疫组织化学染色结果表明,ESCC组织中MGP的阳性率高于癌旁非癌组织.与癌旁非癌组相比,ESCC组中MGP基因启动子区CpG岛甲基化水平降低,两组差异有统计学意义(P<0.05).与对照组相比,MGP过表达组KYSE30细胞的侵袭能力较强;与si-NC组相比,si-DNMT1组KYSE30细胞的侵袭能力较强,组间比较差异均有统计学意义(P均<0.05).结论ESCC组织中MGP表达上调或MGP基因启动子区甲基化下调可以介导ESCC细胞的侵袭.