可卡因-苯丙胺调节转录肽对氧葡萄糖剥夺的培养皮质神经元突触形成的影响

摘要

目的 探讨可卡因-苯丙胺调节转录肽(cocaine-and amphetamine-regulated transcript,CART)对氧葡萄糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)小鼠皮质神经元突触结构的影响.方法 选用健康清洁级昆明小鼠16～17 d孕龄胚胎大脑皮质进行原代神经元培养,分为对照组、CART组、OGD组以及OGD+ CART组.OGD+ CART组在OGD处理后加入0.4 nmol/L CART55-102培养12 h;CART组予以等剂量CART55-102.采用流式细胞术检测神经元死亡率.通过免疫荧光分析观察神经元突触结构变化,并对轴突长度和突触蛋白Ⅰ阳性面积进行定量分析.采用实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹分析检测脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)mRNA和蛋白表达.结果 与对照组比较,OGD组神经元死亡率显著增高,神经元突触生长明显受到抑制,突触蛋白Ⅰ阳性面积显著缩小,BDNF mRNA和蛋白表达水平显著下调(P均＜0.05).与OGD组比较,加入CART55-102后能显著降低OGD神经元死亡率(P＜0.05),逆转OGD对神经元突触生长的抑制作用,使神经元轴突长度及突触蛋白Ⅰ阳性面积显著增大(P均＜0.05),并显著上调BDNF mRNA和蛋白表达水平(P均＜0.05).结论 CART能保护OGD小鼠脑皮质神经元的突触结构,其机制可能与上调BDNF表达有关.