AMP-活化蛋白激酶对局灶性脑缺血再灌注小鼠皮质胱天蛋白酶-8、-3表达和细胞凋亡的影响

摘要

目的探讨抑制AMP-活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）活性对局灶性脑缺血再灌注小鼠梗死体积、缺血皮质胱天蛋白酶-8、-3表达以及细胞凋亡的影响。方法 72只雄性C57BL/6小鼠,随机数字表法分为假手术组、缺血再灌注组和AMPK抑制剂组。线栓法建立大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型。AMPK抑制剂组在MCAO即刻腹腔注射Compound C（20 mg/kg）,假手术组及缺血再灌注组在相同时间点腹腔注射等量生理盐水。应用2,3,5-三苯基氯化四氮唑（2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC）染色法测量脑梗死体积,免疫组化染色法检测胱天蛋白酶-8、-3表达水平,TUNEL染色法检测细胞凋亡。结果假手术组未见梗死灶,无胱天蛋白酶-8、-3以及凋亡阳性细胞。与缺血再灌注组比较,AMPK抑制剂组梗死体积显著缩小[（45.34±7.20）mm~3对（22.71±4.93）mm~3;t=5.730,P=0.037],大脑皮质胱天蛋白酶-8[（17.58±8.62）个/HP对（6.87±4.32）个/HP;t=3.631,P=0.023]、胱天蛋白酶-3[（16.21±5.46）个/HP对（8.22±4.64）个/HP;t=2.630,P=0.021]和凋亡[（78.44±8.32）个/HP对（55.73±6.71）个/HP;t=5.541,P=0.042]阳性细胞数量均显著减少。结论抑制AMPK活性可缩小局灶性脑缺血再灌注小鼠梗死体积,其机制可能与下调胱天蛋白酶-8、-3表达和减少细胞凋亡有关。