睾丸特异性Y编码蛋白5在心肌缺血损伤中的作用

摘要

目的:探讨睾丸特异性Y编码蛋白5(TSPYL5)在心肌缺血损伤中的作用及机制.方法:在体内实验中,构建心肌缺血小鼠模型,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western blot和免疫组织化学染色等方法检测正常对照组和心肌缺血组小鼠心肌组织中TSPYL5的表达情况.在体外实验中,将HL-1细胞分成4组:空白对照组、TSPYL5过表达组、化学缺氧组和TSPYL5过表达+化学缺氧组,采用流式细胞仪检测凋亡率,Western blot检测活化胱天蛋白酶-3(cleaved caspase-3)、Bcl-2和p53的蛋白表达水平,qRT-PCR检测Bax和Bcl-2的mRNA表达水平.结果:与正常对照组相比,心肌缺血组小鼠心肌TSPYL5的mRNA和蛋白表达水平均显著下降(P均＜0.05).使用500 μmol/L氯化钴能够成功诱导HL-1化学缺氧,与空白对照组相比,化学缺氧组凋亡细胞比例和cleaved caspase-3、p53的蛋白表达水平显著升高,Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平显著下降,Bax的mRNA表达水平显著升高;与化学缺氧组相比,TSPYL5过表达+化学缺氧组cleaved caspase-3、p53蛋白水平显著下降,Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平显著升高,Bax的mRNA表达水平显著下降(P均＜0.05).结论:TSPYL5能够通过抑制p53通路减轻缺氧诱导的心肌细胞凋亡.