PCR(聚合酶链式反应)仪温度特性的实验研究与分析

摘要

该文的目的是测量PCR温度的精确性和PCR仪上孔间以及不同循环和不同次测量的温度均一性.PCR程序:95℃(变性),30 s;55℃(退火),40 s;72℃(延伸),50 s;6个循环.孔和管内的温度重复性都很好;变性阶段,孔和管内液体温度与程序温度偏差较大,孔及管内的温度均一性和重复性均很好;孔内温度不能达到通常所需的温度(90℃以上)的比例为22.2%.退火和延伸阶段孔和管内的温差较小;有2个孔不能达到通常需要的温度.实际温度在各阶段停留的时间分别占设定时间的90%的比例较低.这些缺陷可能导致扩增结果假阳性或假阴性.