舞毒蛾核型多角体病毒多角体蛋白基因的克隆、测序和表达(英文)

摘要

从东北林业大学实验林场采集并纯化了舞毒蛾核型多角体病毒 （LdMNPV -NEFU） ,用蛋白酶K消化 ,提取了病毒基因组DNA。用PCR方法 ,克隆出了该病毒的多角体蛋白 （polyhedrin）基因 ,并对该基因进行了序列测定。结果显示 ,该基因序列是一个含有 735个碱基对的开放阅读框 （ORF） ,该阅读框编码 2 4 5个氨基酸。有 5对碱基与加拿大病毒株LdMNPV G的多角体蛋白基因序列存在差异。LdMNPV NEFU分离株的多角体蛋白基因的第 5 4、10 9、379、5 0 8和 70 1位 （从起始密码子中的A开始 ）分别是C ,G ,T ,C和G ,而LdMNPV G分离株的多角体蛋白基因 （ORF）相应位置上的碱基分别是G ,C ,C ,T和T。两个ORF编码的对应位置的氨基酸绝大多数相同 ,只有一对不同 ,即由LdMNPV NEFU编码的天冬氨酸和由LdMNPV G编码的对应位置的组氨酸。以质粒pT7 7为载体 ,多角体蛋白基因在大肠杆菌BL2 1（DE3）菌株中进行了原核表达。