温经通络汤对小鼠膝骨关节炎软骨形态改变和VEGF、MMP-13、HIF-1α表达情况的影响

摘要

目的:观察温经通络汤对小鼠膝骨关节炎模型核血管内皮生长因子(VEGF),基质金属蛋白酶-13(MMP-13),缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响,探讨其对膝骨关节炎的作用机制.方法:采用前交叉韧带离断(ACLT)法建立小鼠膝骨关节炎模型,将30只C57BL/6小鼠随机分为假手术组(A组)、模型组(B组)、温经通络汤高剂量组(C组)、温经通络汤低剂量组(D组)、阳性药组(E组).造模成功后A组与B组分别予以10 mL/(kg·d)生理盐水灌胃,C组与D组分别予以10 mL/(kg·d)温经通络汤灌胃,E组予以10 mL/(kg·d)美洛昔康水溶液灌胃,持续2周.采用组织形态学观察及Mankin's评分评估各组小鼠膝关节表面软骨的损伤程度.采用免疫组化法观察各组膝关节表面软骨中VEGF、MMP-13和HIF-1α的表达水平,采用酶联免疫吸附检测各组膝关节软骨组织中血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶的表达水平.结果:组织形态学观察及Mankin's评分显示与假手术组相比,其余各组的评分均明显升高(P<0.05),与模型组相比,高剂量组、低剂量组、阳性药组的评分明显下降(P<0.05).免疫组化结果表明,高剂量组、低剂量组和阳性药组中小鼠膝关节软骨的VEGF、MMP-13、HIF-1α表达相较于模型组均明显下降(P<0.05).ELISA检测结果显示,与假手术组相比,其余各组的小鼠血清中VEGF、MMP-13及HIF-1α表达均有明显升高(P<0.05),其中模型组小鼠血清中VEGF、MMP-13及HIF-1α的表达最高,高剂量组、低剂量组和阳性药组与模型组相比均有所下降(P<0.05).结论:温经通络汤可能通过调控HIF-1α抑制VEGF及MMP-13的表达发挥缓解及治疗膝骨关节炎的作用.