川芎酚酸提取纯化及对缺氧神经细胞损伤的影响

摘要

目的 优化川芎酚酸类成分提取纯化工艺条件,探讨其对缺氧损伤神经细胞的保护作用.方法 采用L9(34)正交实验,以总酚酸含量为考察指标,对醇浓度、提取次数、提取时间、溶剂用量4个因素进行考察,优选最佳提取工艺条件;采用大孔吸附树脂纯化方法,通过静、动态吸附与解吸实验,对不同型号树脂、上样药液浓度、泄露曲线、上样pH值、洗脱醇浓度、洗脱醇用量、除杂体积进行考察,优选最佳纯化工艺条件;以连二亚硫酸钠(Na2 S2 O4)为造模剂,考察川芎酚酸类成分纯度高低对其缺氧神经细胞损伤保护作用的影响.结果 最佳提取工艺为8倍量90％乙醇回流提取3次,每次2 h;最佳纯化工艺为HPD-300大孔吸附树脂,上样浓度0.2 g?mL-1,树脂比上柱量为1 g?mL-1(药材/湿树脂),先用1倍柱体积(BV)水洗脱,弃去水洗液,再用90％乙醇洗脱8 BV,经二次纯化得酚酸类成分最终纯度为70％.回收率为80％.纯化后,酚酸类成分对缺氧神经细胞的保护作用显著提高,半数抑制浓度(IC50)比纯化前降低48％.结论 该工艺条件稳定可行,可为川芎酚酸类成分的临床合理应用与开发奠定基础.