HPLC法测定合成伊立替康反应中7-乙基-10-羟基喜树碱含量及转化率

摘要

目的:建立合成伊立替康反应中的7-乙基-10-羟基喜树碱含量测定方法和转化率测定的HPLC方法.方法:采用外标法,色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18柱(5μm,250mm×46mm);流动相为甲醇乙腈溶液:用磷酸调pH至4.0的0.05moL/L磷酸氢二钾缓冲液(含10ml-L三乙胺)[(55:5):50];检测波长为266nm;流速为0.8mL/min;柱温30℃,进样量20μl.结果:7-乙基-10-羟基喜树碱浓度与峰面积具有良好相关性,线性范围为0.5(0.48)-50(48)μg/ml,r=0.9999(n=8),精密度RSD为0.72%(n=6),平均回收率为98.7%(n=27),最低检测限为0.24μg/ml,定量限为0.72μg/ml.