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miR-153-3p靶向调控CHI3L1对LPS所致人牙周膜干细胞炎症反应的影响

     

摘要

目的:探索miR-153-3p是否能通过靶向调控几丁质酶3样蛋白1(CHI3L1)改善脂多糖(LPS)所致人牙周膜干细胞(hPDLSCs)炎症反应。方法:分离培养hPDLSCs,采用LPS处理建立炎症细胞模型,并进行miR-NC、miR-153-3p mimics、si-NC、si-CHI3L1以及miR-153-3p mimics+pc-NC、miR-153-3p mimics+pcDNA-CHI3L1转染。转染48h后qRT-PCR法检测各组细胞中miR-153-3p、CHI3L1 mRNA表达,ELISA法检测细胞上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α水平,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western Blot法检测细胞中CHI3L1蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验检测miR-153-3p与CHI3L1的靶向关系。结果:LPS处理后hPDLSCs中miR-153-3p表达下调(P<0.05),CHI3L1 mRNA与蛋白表达均显著上调(P<0.05);过表达miR-153-3p或抑制CHI3L1表达可降低LPS诱导的hPDLSCs中IL-6、IL-1β、TNF-α水平,下调CHI3L1 mRNA与蛋白表达,降低细胞凋亡率,差异均具有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-153-3p可靶向调控CHI3L1表达(P<0.05)。此外,过表达CHI3L1可显著逆转过表达miR-153-3p对LPS诱导的hPDLSCs凋亡与炎症反应的抑制作用(P<0.05)。结论:miR-153-3p可通过靶向调控CHI3L1表达减轻LPS所致hPDLSCs炎症反应,减少细胞凋亡。

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