伊立替康调控SNHG1/miR-195的表达抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及机制研究

摘要

目的 研究伊立替康对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其作用机制.方法 以16 ml/L、32 ml/L、64 ml/L浓度的伊立替康处理肝癌细胞HepG2,MTT法检测细胞增殖,Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p21、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达,qPCR检测SNHG1和miR-195表达.构建抑制SNHG1表达的HepG2细胞,或构建过表达SNHG1的细胞并进行32 ml/L伊立替康处理,观察其对细胞增殖、迁移和侵袭的影响.StarBase软件预测出miR-195是SNHG1的靶基因,双荧光素酶报告实验进一步验证.细胞HepG2中转染anti-miR-195并使用32 ml/L伊立替康处理,检测细胞增殖、迁移和侵袭.结果 不同浓度伊立替康明显降低HepG2细胞活性,并呈剂量和时间依赖性.32 ml/L伊立替康显著减少迁移细胞数、侵袭细胞数、Cyclin D1蛋白、MMP-2蛋白、SNHG1表达量,明显提高P21、E-cadherin蛋白水平(P<0.05).抑制SNHG1表达显著降低24 h、48 h和72 h的细胞活性,减少迁移细胞数侵袭细胞数、Cyclin D1、MMP-2蛋白表达量,提升P21、E-cadherin蛋白水平(P<0.05).过表达SNHG1逆转了伊立替康对HepG2细胞增殖、迁移、侵袭、Cyclin D1、MMP-2蛋白表达的抑制作用,以及逆转对P21、E-cadherin蛋白表达的促进作用.SNHG1靶向调控miR-195表达.抑制miR-195表达逆转伊立替康抑制HepG2细胞增殖、迁移、侵袭的作用.结论 伊立替康通过调控 SNHG1/miR-195 表达抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭.