椎间盘退变大鼠基质金属蛋白酶和金属蛋白酶组织抑制因子1表达及髓核超微结构的变化

摘要

目的 研究椎间盘退变大鼠基质金属蛋白酶和金属蛋白酶组织抑制因子1表达及髓核超微结构的变化机制.方法 实验分随机分为2组:对照组(为正常健康大鼠,做假手术处理n=10);模型组(对大鼠做椎间盘退变手术并做磁共振成像检查,n=10).2组大鼠相同环境下饲养,实验前12 h只对大鼠进行清水饲养,2周后对2组大鼠进行实验处理.通过RNA提取和实时PCR分析MMP-9和TIMP-1 mRNA表达;通过酶联免疫吸附测定血清中TIMP-1和MMP9含量;通过蛋白质印迹分析血清中IL-1β和IL-6及TNF-α的蛋白表达情况;采用IHC染色分析2组CCL3和CCL4表达水平;通过CCK-8评估细胞活力检测髓核细胞凋亡率.结果 与对照组TIMP-1(35.43±5.28)ng/ml和MMP-9(82.18±4.26)ng/ml相比,模型组TIMP-1(83.16±4.36)ng/ml和MMP-9(237.54±1.27)ng/ml含量升高(P<0.05);在TIMP-1和MMP-9 mRNA表达上,模型组(3.05±0.05)(2.37±0.15)较对照组(1.24±0.23)(1.37±0.01)升高(P<0.05);2组大鼠炎症因子IL-1β和IL-6及TNF-α的蛋白表达情况上模型组(3.12±0.17)(2.94±0.03)(2.76±0.18)较对照组(1.53±0.02)(1.36±0.05)(1.27±0.03)升高(P<0.05);CCL3和CCL4的蛋白表达上,模型组(3.18±0.04)(2.97±0.02)较对照组(1.15±021)(1.04±0.05)升高(P<0.05);髓核细胞的凋亡率模型组(56.08±2.37)较对照组(12.44±1.29)升高(P<0.05).结论 椎间盘退变大鼠基质金属蛋白酶和金属蛋白酶组织抑制因子1表达升高,并影响髓核超微结构.