逆转录PCR扩增杂交瘤细胞内特异性免疫球蛋白重链可变区基因

摘要

目的利用细胞内逆转录PCR技术扩增杂交瘤细胞内的特异免疫球蛋白重链可变区基因片段.方法用10%甲醛溶液固定杂交瘤细胞,以NP-40渗透化处理细胞后做逆转录PCR.结果获得了大约350 bp的特异性免疫球蛋白重链可变区基因片段,与用同一对引物得到的常规逆转录PCR扩增产物一致.结论此方法操作简便,效率高,可用于获得特定结构基因片段,连接并扩增嵌合蛋白基因及构建多克隆免疫球蛋白文库等.