利用原生质体培养技术选育根霉新菌株1.根霉(Rhizopus formosaensis)Q303原生质体的形成和再生

摘要

把在ＹＰＧ液体培养基中震荡培养（１００ｒｐｍ）４～６ｈ的根霉孢子放入酶液（蜗牛酶２５ｍｇ／ｍｌ＋溶菌酶２０ｍｇ／ｍｌ＋Ｎｏｖｏｚｙｍ－２３４５ｍｇ／ｍｌ）内，在３０℃下震荡（１００ｒｐｍ）酶解３～４ｈ，原生质体形成率为５３．６％。经过滤离心纯化，原生质体的获得率为３５％，以荧光增白剂染色，在荧光显微镜下观察，未见兰色荧光，而未脱壁的孢子经同样处理观察，细胞壁上有蓝色荧光。将纯化后的原生质体涂布于再生培养基上，在３０℃下暗培养１２ｈ后，约１．４％的原生质体再生长出菌落。此种再生菌株在形态及生长习性上与原菌株无明显差异。