细胞松弛素B诱导马氏珠母贝四倍体形成机制研究

摘要

为了解在珍珠贝多倍体诱导中四倍体形成的机制,用醋酸地衣红染色技术研究抑制马氏珠母贝(Pinctada martensii)受精卵第一极体排放后的染色体行为.试验用贝为人工养殖贝,贝龄为2～3龄.试验用水为沙滤海水,海水比重1.018～1.020,pH值8.10～8.30.26℃～28 ℃下人工授精,授精前用6×10-6氨水处理卵子10 min～15 min.处理组用0.5 mg/L细胞松弛素B(CB)处理受精卵15 min;对照组为不做任何处理的受精卵.受精后每隔3 min取样观察,直至受精后60 min.观察结果表明,在第2次减数分裂期间,染色体分离有4种主要类型,即"随机三极分离"(28.1%)、"不混合三极分离"(7.6%)、"联合双极分离"(19.3%)和"离散双极分离"(13.6%),余下的31.5%因染色体混乱或难以确定而无法分类,但似乎是以上4种分离的变体.在受精后33 min～42 min,在联合双极、三极和离散双极分离的细胞中分别形成2,3和4个原核.将各种分离类型所出现的频率与产生的三倍体(33%)和四倍体(22%)比较,表明导致四倍体形成的是"离散双极分离";"不混合三极分离"也可能导致四倍体的形成;导致三倍体形成的是"联合双极分离";导致非整倍体形成的是"随机三极分离"和其他不规则的分离.