人野生型MBL基因在大肠杆菌中的表达

摘要

为获得人MBL蛋白,并对其功能进行初步研究,用DNA重组法构建了组氨酸标签融合原核表达质粒pET28(b)-MBL.将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG在37℃条件下诱导培养,利用SDS-PAGE、Western-blot检测目的蛋白的表达,用IMAC金属螯合层析柱对其进行纯化.成功地表达了重组MBL蛋白,纯化的MBL浓度约为844μg/mL,为制备MBL的基因工程抗体奠定了基础.