TRPC6 DNA甲基化在同型半胱氨酸致胰岛β细胞焦亡中的作用研究

摘要

目的探讨瞬时感受器电位通道6(TRPC6)DNA甲基化在同型半胱氨酸致胰岛β细胞焦亡中的作用。方法20只cbs^(+/-)小鼠随机分为2组,每组10只。对照组为正常普通饮食,高蛋氨酸组为高蛋氨酸饮食(普通饮食中加入1.7%蛋氨酸)。采用全自动生化分析仪检测小鼠血糖水平;Western blot检测焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β和TRPC6的表达;qRT-PCR测定胰岛β细胞TRPC6 mRNA表达水平;qRT-PCR和Western blot检测DNMT1、DNMT3a及DNMT3b mRNA和蛋白的表达;采用巢式降落式特异性PCR(nMS-PCR)测验TRPC6 DNA甲基化水平;Pearson相关系数对胰腺组织中TRPC6甲基化水平与血糖以及细胞焦亡水平进行相关性分析。结果与对照组比较,高蛋氨酸组中cbs^(+/-)小鼠血糖水平明显升高(P0.05);Pearson相关性分析发现TRPC6甲基化水平与血糖水平(r=-0.7824,P=0.0075)以及NLRP3(r=-0.7775,P=0.0081)、Caspase-1(r=-0.8992,P=0.0004)、IL-1β(r=-0.6691,P=0.0344)蛋白表达均呈负相关。结论同型半胱氨酸可以诱导胰岛β细胞焦亡的发生,而TRPC6 DNA低甲基化表达可能是Hcy诱导胰岛β细胞焦亡发生的重要机制之一。